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秀麗線蟲高通量分選系統

  • 更新時間:2024-10-10
  • 訪  問  量:934

簡要描述:微型模式動物、模式植物、大體積細胞等在生命科學研究中有著非常廣泛的應用,但是由于這些對象體積太大,普通的流式細胞儀的粒徑尺寸一般在幾十微米,難以對秀麗線蟲、斑馬魚這樣的大粒徑模式生物進行分析和分選;手工鏡下分選非常耗時耗力、效率低下、準確性難以保證

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產品詳情

微型模式動物、模式植物、大體積細胞等在生命科學研究中有著非常廣泛的應用,但是由于這些對象體積太大,普通的流式細胞儀的粒徑尺寸一般在幾十微米,難以對秀麗線蟲、斑馬魚這樣的大粒徑模式生物進行分析和分選;手工鏡下分選非常耗時耗力、效率低下、準確性難以保證。COPAS高通量分選系統是一款特殊設計的分選型流式細胞儀,流通室徑向尺寸可達2000微米,可以對秀麗線蟲、蠶卵、斑馬魚卵及幼魚、果蠅等模式生物進行高通量、自動化的分析和分選。


COPAS高通量分選系統能夠很大程度上提高了分選效率,完成大規模的樣品分選工作,實現高通量分選。還可對多種數據進行分析,可以開展用傳統實驗手段難以開展的課題實驗。


COPAS高通量分選系統在國際上有數百家實驗室的成功應用案例,在很多期刊也有很多引用文獻。該設備的應用,能夠幫助實驗室在很大程度上提高實驗效率、拓展科研方法、縮短科研產出時間。 

型號:COPAS FP


主要特點:

  • ? 多種規格的流動室可選,分選粒徑20-1500um的模式生物、細胞群、大粒徑生物微粒、微珠
  • ? 全自動、快速、精確分選和分析
  • ? 提供分選顆粒數字化定量數據,可用于用戶對目標群體的統計分析
  • ? 無菌環境及溫和氣流分選方式,能夠有效保持分選樣品的潔凈和存活率


主要功能:

? 高通量分選能夠很大程度上提高分選效率,同時可以開展用傳統試驗方法難以開展的實驗
? 設備通過檢測樣品的多種光學信號,依據檢測到的信號進行自動化分選,排除了人為主觀因素:分選更客觀,更準確
? 設備可以把生物樣本自動分選到24,48,96或384孔板中,也可以自定義,實現分選的自動化
? COPAS高通量分選系統是在常規分選型流式細胞儀基礎上研發和改進而成,流動室內壓力小,采用溫和的氣流分選方式,可以確保生物體的活性和完整性,對后續培養、分析甚至是再次分選不會產生負面影響
? 系統自動存儲每個模式生物、微粒的光學數據,可用于進一步的統計和分析

? 可根據需要,選配專業化分析軟件:能夠在樣本徑向長度方向上進行多達8000個斷層的光學監測,給出細胞-器官水平的光學參數信息,包括尺寸、光密度和熒光強度(例如斑馬魚心臟的神經元上的熒光信號),并以峰值曲線圖的形式導出,可提供峰的個數、峰寬、峰高和相對位置等各種參數

? 儀器操作簡單,一個人便可完成大規模的樣品分選工作,實現高通量分選



主要應用:

? 種群差異分析(Population differences analysis)

 ·成長階段分選

 ·藥物篩選、化學誘導
? 熒光表達篩選(Fluorescence expression sorting)

 ·單熒光篩選

 ·多熒光篩選
? 基因表達定位分析(Gene expression localization analysis)

 ·熒光峰值篩選

 ·樣品亞群分析
? 熒光定量分析(Fluorescent quantitative analysis)


工作原理及主要配置:

工作原理

通過獲取多種光學參數徑向尺寸、光密度、三色熒光強度對微粒進行分選




分選方式

采用溫和的氣流分選方式,能夠很大程度上保障分選后生物微粒的生物活性和完整性(可對同一個樣品多次分選)



光學部件布局

COPAS高通量分選系統的光學原件布局俯視圖


流動室

每條線蟲或生物微粒被鞘液包裹,依次通過流動室,在流經過程中測量出各種分選參數



激光器

配備488nm激光器,用于測量物體的軸向長度和光學密度,還可以用來激發熒光

根據研究需要,可調整激光器的配置,有多種規格激光器可選:375nm,405nm,488nm,561nm或640nm



分選參數

通過檢測和分析生物微粒的多種參數,進行分選

飛行時間(TOF)、透光度(EXT)、熒光強度(FLU) ,同時檢測多達三種顏色的熒光


基礎分析軟件

分選參數設置、分選控制與數據分析



Profile高階分析軟件

具備多種參數峰值特性分選功能


生物微粒通過流動室,沿軸向方向將光密度和熒光圖案數字化

下圖是使用Profile軟件,Profiling GFP-expressing seam cells in nematodes(牛津大學伍拉德實驗室)



LP Sampler自動進樣器

COPAS高通量分析系統可配合LP Sampler組成一套更加完整的高通量分選平臺,實現對多孔板樣品的自動化加樣和自動分選



主要技術參數:

· 用于做所有發育階段的秀麗線蟲、10-150um的細胞與細胞集群、海膽胚胎、生物微珠、花粉、腎導管細胞等

· 可自動檢測流經系統的每個樣品的各種檢測參數,并記錄與統計

· 流通室內徑尺寸:250um

· 可以檢測多種參數,飛行時間(TOF)、透光度(EXT)、熒光強度(FLU) ,同時檢測多達三種顏色的熒光

· 包含系列高精度的檢測元件,如光電二極管和光電倍增管、系列光柵,可同時檢測綠色,黃色和紅色熒光

· 配備488nm固體激光器,用于測量物體的軸向長度和光學密度,還用來激發熒光

· 熒光檢測靈敏度:FITC<100MESF

· 全峰寬變異系數:CV<2%

· 濾光片:熒光通道濾光片包括530/30nm、585/42nm、670nm LP

· 樣品檢測處理速度:1000個樣品/秒;分選時樣品處理速度為50個樣品/秒

· 自動分選精度>95%

· 樣品接收器,可選用24孔板,48孔板,96孔板

· 每個孔板樣品數量可自由定義,最多每個孔可加載570個樣品(標準96孔板)

· 具有自動化的X-Y移動臺,可放置微孔板或其它收集器,自動加載定位

· 最小分選體積:0.4ul

· 采用通用型樣品杯,容量為50ml

· 具有內置攪拌混勻功能,通過軟件設置混勻參數

· 采用的氣流分選機制,減少分選對樣品的影響,分選過程對樣品的生物活性無不良影響

· 具有樣品回收功能,用于收集沒被分選的樣本,使樣本可以重復使用

· 可設置分選樣品時的液滴長度和延遲時間

· 具有大容量鞘液容器,容量4L,可支持系統連續運行6小時

· 具備壓力實時監測功能:可實時測量鞘液壓力、樣品壓力、分選壓力、清洗壓力

· 具備熒光補償功能:高精度自動補償裝置,在線或脫機補償

· 配備計算機工作站,并預裝操作系統和分析軟件

· 基于PC機和WINDOWS操作平臺的軟件系統,具備實時分析功能

· 數據可追溯:系統自動保存每個樣品的檢測數據,可保存為CSV格式,可用于后期分析

· 自動統計分選樣品占總樣品的比例,并實時自動顯示




What’s new with COPAS?


In the most recent update of the COPAS platform we have upgraded the system electronics and this moved COPAS to the newer, friendlier, more powerful FlowPilot software suite. This change is denoted by the name COPAS FlowPilot, abbreviated as COPAS FP. In this new version the model names COPAS BIOSORT, SELECT, PLUS and XL have been replaced by the more meaningful COPAS FP-250, FP-500, FP-1000 and FP-2000.

The COPAS FP platform is designed for the measurement of objects ranging in size from 20–1500 microns (diameter). Each of the four COPAS FP models features a fixed, specially engineered fluidic path, flow cell and optics optimized for a specific subset of that size range to provide maximum speed, accuracy, resolution and throughput, depending on the application. Instruments can dispense objects either into bulk receptacles or multiwell plates.

A 488 nm solid state laser is used to measure both the size and optical density of the objects, as well as for fluorescence excitation. Each COPAS FP system can be equipped with up to three lasers.

The real-time analysis of these measured parameters is used to make sort decisions and only those objects meeting the user-selected sort criteria are gently dispensed into multiwell plates or stationary receptacles. Those objects not meeting the sort criteria are diverted by a puff of air to a sample recovery container, where they may be recaptured, unharmed and still viable.

Instruments are equipped with an X-Y stage to permit the dispensing of objects into micro-wells, including 24-, 48-, 96-, and 384-well plate formats. Using the FlowPilot™ software, users may custom design templates or use default templates.

Factory trained personnel will install your new COPAS FP system and train you at your site in the operation and routine maintenance of the system and accessories.

All systems are supplied with a Windows® workstation running FlowPilot™ software for operation and analysis.


Choosing a COPAS FP Model


Each COPAS FP system features a specially engineered fluidic path and flow cell optimized for a specific object size range to achieve the highest accuracy and sensitivity possible. The table shown at Choosing the Right Platform and Model summarizes the largest object size recommended for each COPAS FP model and also provides general system recommendations based on some sample applications. The applications listed are not exhaustive, but simply meant to provide a general overview of system capabilities. For a more detailed discussion of your particular application, including those applications that are not listed here, please contact our applications scientists directly at yuyan0317.



 

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